l 说明:
PVDF膜通常都需要酒精预湿(Prewet)、洗涤。这些操作一方面需在无菌条件下完成,过程繁杂;另一方面,洗涤如果不彻底,膜上残留的乙醇对抗体的包被乃至后续细胞因子检测等均有不同程度的影响。为了帮助广大的ELISPOT实验操作人员减轻工作强度、节省宝贵的时间,同时也为了减少污染的机会,达科为公司经过不懈地努力与反复地验证,终于研发出了有自主知识产权的PVDF膜ELISPOT包被抗体缓冲液Magi™ Coating Buffer(货号DKW01-0030),能够免除酒精预湿和洗涤的步骤,同时有效保护包被抗体。
l 使用方法:
Magi™ Coating Buffer的使用方法极简单:先取15μl Magi™ Coating Buffer润湿PVDF孔,待孔完全润湿之后(只要Magi™ Coating Buffer接触到了孔底,会在2-3秒之内完全润湿整个孔,膜的颜色变得透亮)然后加入50μl 经PBS稀释过的包被抗体,4˚C包被过夜。见前面的“方案A Magi™ Coating Buffer润湿包被程序”,这种方法省去了预湿之后的洗涤步骤,也能得到和传统酒精预湿一样的效果。
l 注意事项:
² 抗体冻干粉仍然用去离子水溶解。千万不要用Magi™ Coating Buffer来溶解冻干粉!
² 包被抗体应该在使用前才稀释,随用随稀释。因为抗体稀释之后,浓度变低,稳定性下降。
² 4˚C包被过夜(12-24小时,通常18小时)是经过优化的包被条件,我们不推荐室温或者37˚C的快速包被。
Magi™ Coating Buffer 4˚C可以保存一年,注意保持无菌。