随着社会的急速发展,环境污染、食品安全等问题日益加剧,安全成为我们每天都在思考的问题。
呃,小达开始陷入深深的沉思……
忙于科研事业的实验汪们每天都有可能接触有毒有害试剂,即使全副武装小心翼翼,还是有踩雷的时候。好吧,既然实验不可避免,我们大可以选择相对安全的产品。
简单来说,就是小达要给大家推荐一款真正安全无毒的核酸染料,来自达优的SpectRedNucleic Acid Dye(货号:8062041),简称ND4。
产品特点:
高灵敏度:灵敏度至少是溴化乙锭(EB)的4倍,背景更低;
高安全性:不能透过细胞膜,诱变性远小于EB,安全无毒,无致癌性;
高稳定性:室温下在酸性或碱性缓冲液中稳定;
与EB有相同光谱特性,可检测单链或双链的DNA或RNA。
如何做到真正的安全无毒?揭秘来了~
我们从两方面入手,一是分子量。ND4的分子量约为1400,是油性大分子染料,不能穿过细胞膜上的通道;
图3. 分子量小于600的分子可自由通过细胞膜,分子量大于600的分子不可自由通过细胞膜。
图4. ND4的质谱图谱,显示分子量在1400左右。
第二,基于同性电荷相互排斥的原理,ND4带4个正电荷,与细胞膜外的正电荷相互排斥,染料不能进入胞内,也就对人体没什么危害。
对细胞的穿透性:ND4是油性大分子核酸染料,并带有正电荷,不能穿透细胞膜。而EB和SYBR都可以穿透细胞膜,对核酸进行染色。
图5. 不同种类核酸染料对细胞穿透性实验结果。
在37℃条件下,HeLa细胞在1×EB、1×SYBR和1×ND4,分别孵育5min、10 min或30 min。
ND4使用方法(泡染):
按照常规方法进行制胶电泳。将SpectRed Nucleic Acid Dye(10,000×)稀释约3300倍到0.1 M的NaCl溶液中,制成3×染色液(30 µL10,000×染料和10mL 1 M NaCl加到90mLddH2O 中);
将凝胶浸没在3×染色液中,可放摇床上或静置染色约30 min左右,最佳染色时间根据凝胶厚度及琼脂糖浓度不同而略有不同。对于3.5%-10%丙烯酰胺胶,染色时间通常介于30min到1h。使用凝胶成像系统观察结果。
相关产品信息:
达科为生物工程有限公司作为达科为集团全资子公司,是一家国家高新技术企业。目前开展临床和科研产品研发和生产。科研产品包括分子生物学、细胞培养和免疫诊断等产品。达科为生物工程不断创新,推出快速凝胶试剂盒、PCR Mix、核酸染料、Marker系列产品、RNA提取试剂盒、逆转录产品、实时荧光定量产品、克隆试剂盒、胶回收试剂盒和质粒提取试剂盒等系列达优®分子产品。