养细胞的都知道，细胞要宠要呵护还要担惊受怕，最怕听到污染二字。。。

特殊的节日，先感受一波有关细胞的土味情话～

通常来说，凡是混入培养环境中对细胞生存产生有害成分和造成细胞不纯的异物都应该视为污染。

污染途径

• 空气：是微生物及尘埃颗粒传播的主要途径；

• 器材：培养器皿清洗、消毒不彻底，培养箱未进行定期消毒；

• 操作：无菌观念不强，技术不熟练，操作不规范导致细胞交叉污染，使用污染的器皿等；

• 血清：使用已被支原体或病毒污染的血清；

• 组织样本：原代培养的污染大多源自组织样本。

常见微生物污染

根据污染源主要分为生物性污染、化学性污染和物理性污染。体外培养细胞最常见的是生物性污染，也就是我们常说的微生物污染，包括细菌污染、真菌污染、支原体污染等。

• 细菌污染：常见有大肠杆菌、假单胞菌、葡萄球菌等。污染后，随着细菌的大量增殖产生大量酸性物质，培养基短时间内会从红色变为黄色，培养基变浑浊，相差显微镜下可见点状细菌颗粒。（抗生素多用于预防细菌污染）；

• 真菌污染：包括霉菌污染和酵母污染，通常这类污染肉眼可见，大多数呈白色或浅黄色小点漂浮于培养液表面，镜下观察呈丝状、管状、树枝状的真菌交错穿行于细胞之间。念珠菌和酵母菌呈卵圆形，散布生长在细胞周边和细胞之间。短期内培养基多不变浑浊；

• 支原体污染：支原体是一种大小介于细菌和病毒之间、能独立生活的微生物，无细胞壁结构，可通过过滤器。支原体可与细胞共存，污染后细胞无明显变化，培养基通常不浑浊。支原体污染很难察觉，是最常见的干扰试验结果的一种污染。大多数的支原体污染来源于血清。

预防污染的方法

• 强化细胞培养的无菌意识（如消毒工作、穿戴实验服和口罩等）；

• 良好规范的操作；

• 注重培养过程（早预防、早发现、早处理）。

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