只需自备标准品、抗体对和HRP/AP检测试剂,轻松制备ELISA。
Innova Biosciences FlexLISA®主要是用于开发和优化双抗体夹心ELISA,将抗体对分别与Streptavidin和HRP/AP标记,然后将样本和标记抗体对分别加入预包被Biotin 96孔板,室温孵育1小时,清洗后加入酶检测试剂即可实现检测。
试剂盒组分
自备:标准品、抗体对和HRP/AP检测试剂
实例数据:
1. 使用LL-HRP标记CRP检测抗体并使用CRP标准品做校准曲线的ELISA检测;
检测试剂:TMB;
标准曲线拟合:线性方程(A)和4参数对数方程(B);
测定800,200和50 pg/ml CRP(C)的批内%CV(n = 24)。
2. 使用LL-HRP和Ampliflu®Red(激发波长:530nm,发射波长:590nm)
作为检测试剂对CRP的ELISA检测;
3. 使用LL-AP标记CRP检测抗体并使用CRP标准品做校准曲线的ELISA检测;
检测试剂:PNPP;
标准曲线拟合:线性方程(A)和4参数对数方程(B);
测定800,200和50 pg/ml CRP(C)的批内%CV(n = 24)。
4. 步骤:在链酶亲和素标记CRP捕获抗体和HRP/AP标记CRP检测抗体存在下,耗尽CRP的人血清加到250pg/ml CRP并连续稀释后加到透明的96条板状板中;
制备已知量的CRP的标准曲线也加到板中。
TMB和PNPP分别检测HRP和AP。
计算:拟合标准曲线,通过测量吸光度来确定添加到板中的样品的CRP浓度。
结果:对于所有稀释度,计算的CRP量在实际值的10%以内。